日本富士瑞必歐HIV-1/2艾滋病PA診斷試劑(乳膠凝集法)
1)原理本品是一種用來檢測HIV-1/2抗體的體外診斷試劑。它是將重組HIV-1抗原(HIV-1/gp4l和HIV-1/P24)和HIV-2抗原(HIV-2/gp36)包被在人工載體明膠粒子上。這些致敏粒子和血中的HIV-1或HIV-2抗體進行反應發生凝集(particle agglutina-tion test,PA法),由此可以檢測出血清和血漿中的HIV-1/2抗體。
2)基本檢測程序
(1)按說明要求,配制致敏粒子和對照粒子,充分混勻,待用。
(2)稀釋樣品:加3滴(75u1)樣品稀釋液于“U”形反應板第1孔。第2、第3孑L分別加入一滴樣品稀釋液(25u1)。用微量移液器取25ul待檢樣品至第1孔中,充分混勻,然后用微量移液器取25u1至第2孔,充分混勻,再移25 ul到第3孔充分混勻后,移棄25 u1。為準確起見,陽性對照試驗應與樣品試驗平行進行。
(3)用試劑盒中提供的滴管在第2孔中滴入1滴(25u1)對照粒子,在第3孔中滴入1滴(25u1)致敏粒子。
(4)用平板混合器以不會導致微量反應板內容物濺出的強度混合30 s,加蓋后于室溫(15~30℃)下水平靜置。2 h后觀察結果。
(5)結果判定標準
陰性:粒子成紐扣狀聚集,呈現出外周邊緣均勻且平滑的圓形。
可疑:粒子形成小環狀,呈現出外周邊緣均勻且平滑的圓形。
陽性:粒子形成大環狀,其外周邊緣也不均勻且雜亂地凝集在周圍。
強陽性:產生均一的凝集,凝集粒子在底部整體上呈膜狀延展。
(6)結果判定
陽性:對照粒子(最終稀釋倍數1:16)的反應圖像判定為(一),致敏粒子(最終稀釋倍數1:32以上)的反應圖像判定為(+)時,最終判定為陽性。
陰性:無論對照粒子呈現何種反應圖像,只要致敏粒子(最終稀釋倍數1:32)的反應圖像顯示為(一)時,最終判定為陰性。
保留:對照粒子(最終稀釋倍數1:16)的反應圖像判定為(一),且致敏粒子最終稀釋倍數1:32)的反應圖像判定為(士)時,最終判定為保留。
(7)重吸收試驗:對于對照粒子和致敏粒子均顯示(±)或陽性以上的樣品,應進一步做如下重吸收試驗。
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