什么香烟好抽,南京金陵十二钗香烟价格,利群香烟多少钱,烟草网

背景簡介
　　前列腺癌是中老年男性的常見多發病，在男性所有類型癌中占10%～20%, 是男性最常見的癌腫。測量血清中的前列腺特異抗原PSA可以用于篩選和早期診斷前列腺癌。它是公認的診斷前列腺癌的較好的腫瘤標志物，其診斷前列腺癌的特異性為82%-97%。前列腺特異抗原(prostate specific antigen , PSA) 是與前列腺癌相關的一種抗原，屬糖蛋白類物質。PSA和肛診是目前第一線家庭醫師或泌尿科醫師們篩檢早期前列腺癌的重要工具。 

試劑盒研制開發流程和結果： 
　　1.PSA單克隆抗體的制備 
　　最終篩選得到5株雜交瘤細胞株，分別測定其亞型，并通過競爭ELISA實驗進行表位分析。其中3株在之后的抗體配對實驗中驗證配對，其效價見下表。

Clone	Ab Titer(OD450±SD)	Ig subclass
S-44-10	2.350±0.079	IgG1,κ
S-102-11	20612±0.011	IgG2a, κ
S-191-5	2.332±0.081	IgG1,κ

　　*The supernatant was from the culture of 1×106 hybridoma cells in 9 ml medium for 3 days.

　　2.建立ELISA檢測試劑盒體系 
　　（1）抗體配對分析 
　　將獲得的5株單克隆抗體分別進行純化和標記，進行兩輛交叉配對試驗，最終篩選到兩組配對可用于雙抗體夾心法的ELISA試劑盒：S-44-10 (A) — S-191-5 (D)- HRP，S-102-11(B) — S-191-5(D)- HRP。 分別用于檢測總PSA （tPSA）和 游離PSA ( fPSA)。 
　　如下圖所示（A：S-44-10抗體 B：S-102-11抗體 D：S-191-5抗體） 

　　（2）兩種試劑盒的檢測標準曲線的建立（雙單抗夾心法） 
　　經摸索優化試劑盒中各種成分，最終選定了相應的原料使用濃度、試劑配方和反應條件。如圖所示：此兩種試劑盒檢測標準品均具有很好的線性關系。 

　　(3) 試劑盒標準品 
　　標定是測定的基礎，利用 NIBSC國際標準品對fPSA和tPSA試劑盒進行標定。 
　　NIBSC國際標準品：

• a. Prostate Specific Antigen (90:10) 96/670 (WHO International Standard or Reference Reagent);
• b. Prostate Specific Antigen (free) 96/668 (WHO International Standard or Reference Reagent);
  

  本公司利用基因工程技術，在昆蟲真核系統中通過昆蟲細胞桿狀病毒系統表達并純化了重組的PSA，重組PSA用NIBSC標準品標定后，可以作為兩種試劑盒中的參照品使用。重組PSA作為試劑盒標準品的鑒定，如下圖所示。 

　　(4)小樣本臨床實驗 
　　將自行研制的試劑盒測定PSA臨床樣本（27份陽性+30份陰性）, 以瑞典CanAg公司的試劑盒作為比較參照。

		自制試劑盒
		癌癥	非癌癥	合計
Canag試劑盒	癌癥	a	b	C
	非癌癥	c	d	D
	合計	A	B	H

　　 30份臨床陰性血清T-PSA兩種試劑盒測定結果對比圖 
 
　　27份臨床陽性血清T-PSA兩種試劑盒測定結果對比圖 
 
　　30份臨床陰性血清F-PSA兩種試劑盒測定結果對比圖 
 
　　27份臨床陽性血清F-PSA兩種試劑盒測定結果對比圖 
 
　　診斷標準：小樣本臨床試驗設定的前列腺癌本試劑盒診斷標準為：
　　1）當tPSA > 10 ng/ml 判為陽性； 
　　2） 當tPSA 處于灰區2.5 -10 ng/ml時， 則采用fPSA/tPSA < 0.25 判為陽性。 

		自制試劑盒
		癌癥	非癌癥	合計
Canag試劑盒	癌癥	24	1	25
	非癌癥	0	32	32
	合計	24	33	57

　　（5）PSA試劑盒特性測定 
　　線形范圍、靈敏度：

　　試劑盒準確度： 

　　試劑盒特異性： 

　　試劑盒變異度： 
　　10ng/ml的樣本，測量8次，批內變異度CV = 8.00%, 符合 CV < 15% 的要求。

取得成果 
　　已研發出分別針對血清中游離PSA（f-PSA）以及總PSA（t-PSA）的檢測試劑盒，首次建立了“一步法”快速反應操作體系與流程，將整個操作過程時間縮短到了一小時以內。建立和優化了夾心ELISA法檢測體系，包括試劑盒各組分的確定，各組分配方、使用條件及參數的優化，檢測標準曲線的建立以及診斷標準的確定等。用NIBSC國際標準品對f-PSA及t-PSA兩種檢測試劑盒進行了標定，并通過基因工程手段自制了重組PSA蛋白，用國際標準品標定后，可用于兩種試劑盒參照品。 
　　F-PSA試劑盒靈敏度為0.46ng/ml，準確度為94.1%，特異性為100%，批內變異度為8%；T-PSA試劑盒靈敏度為0.50ng/ml，準確度為94.1%，特異性為100%，批內變異度為8%。 
　　小樣本臨床試驗證實本試劑盒與 Canag產品性能相似，57例樣本檢測的診斷結果對比顯示靈敏度 = 24 / 25 x 100% = 96.0% ,特異度 = 32 / 32 x 100% = 100% ,準確率= ( 24 + 32 )/ 57 x 100% = 98.2%。