印跡技術簡介
發布時間：2016-6-23 17:01:01??????瀏覽次數：
印跡技術是指將待測核酸分子結合到一定固相支持物上的方法。
southern印跡，將電泳分離的DNA片段轉移到一定的固相支持物上的過程。
DNA分子被限制酶切，經瓊脂糖凝膠電泳，將DNA片段按照分子量大小分離，然后將含DNA片段的瓊脂糖凝膠變性，將其中單鏈DNA轉移到硝酸纖維濾膜或者其他固相支持物上。而DNA片段的相對位置保持不變。可做下一步雜交反應。
northern印跡，將RNA變性及電泳分離后，將其轉移到固相支持物上的過程。
western印跡
也稱Western免疫印跡（WesternBlot或WesternBlotting），是指將蛋白質樣品經聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，然后轉移至到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，然后用抗體通過免疫學反應檢測目的蛋白，分析基因的表達程度。能用堿變性，防止水解。用甲醛變性。
southern印跡的步驟
1.從組織中提取DNA
2.用特定的核酸內切酶酶切
3.瓊脂糖凝膠電泳
4.堿變性
5.中和反應
6.轉膜
7.固定
8.雜交
9.雜交信號檢測
northern印跡的步驟:
1.從細胞中提取總RNA
2.甲醛凝膠變性電泳
3.轉膜
4.固定
5.雜交
6.雜交信號檢測
western印跡的步驟
1.蛋白質樣品制備
2.SDS-PAGE電泳
3.轉膜
4.封閉
5.一抗孵育
6.二抗孵育
7.顯色
- 上一篇：寨卡病毒引嬰兒小頭癥風險拉美孕婦墮胎率猛增 2016/6/24
- 下一篇：熒光原位雜交技術應用與前景 2016/6/23
