從細胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA
從細胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA
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1．數分鐘內快速純化得到高品質總RNA
2．即用型RNA在各種下游應用中表現良好
3．少量起始樣本，RNA產量穩定
4．無需酚/ 氯仿抽提，無需氯化銫梯度離心，無氯化鋰或者乙醇沉淀步驟
RNeasy Mini Kit可從細胞、組織或酵母中快速純化高品質RNA，硅膠膜RNeasy離心柱的結合能力達100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動核酸純化儀上應用RNeasy Mini Kit實現RNA純化自動化。處理更小或更大的樣本，可使用RNeasy Micro Kit（離心柱結合能力為45 μg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結合能力為1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（離心柱結合能力為6 mg RNA）。
詳細信息：
性能
RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動物或人類組織樣本，或從100–1 x 107個動物或人類細胞樣本或酵母中純化總RNA。
RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產量
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樣本來源 |
起始材料 |
平均產量（μg） |
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動物細胞 |
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小鼠組織 |
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真菌細胞 |
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原理
RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴謹性和硅膠膜純化的速度和純度，簡化了總RNA純化技術。純化得到高品質的RNA，并且DNA殘留水平達到最低。
操作流程
RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個動物或人類細胞中、0.5–30 mg動物或人類組織中或小于5 x 107個酵母細胞中方便的純化總RNA。先對樣本進行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜。RNA結合到膜上（最多可結合100 μg），污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應用，可在RNeasy操作過程中進行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100 μl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA。還有各種特殊應用的實驗方案可供選擇。
應用
使用RNeasy技術純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1（10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應用，包括：
1．Northern印跡、點印跡和狹縫印跡
2．終點式RT-PCR
3．定量real-time RT-PCR
4．芯片分析
5．Poly A+ RNA篩選
技術參數：
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特點 |
參數 |
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Applications |
PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
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Elution volume |
30–100 μl |
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Format |
Spin column |
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Main sample type |
Tissue, cells |
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Processing |
Manual (centrifugation) |
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Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
Total RNA |
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Sample amount |
0.5–30 mg |
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Technology |
Silica technology |
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Time per run or per prep |
20 minutes |
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Yield |
Varies |
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