從動物血液和組織、細胞、酵母、細菌或者病毒中純化總DNA
從動物血液和組織、細胞、酵母、細菌或者病毒中純化總DNA
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1.為各種類型樣本提供標準化的純化方法
2.即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產量DNA
3.高品質DNA
4.經過優化的操作方法適合處理多種起始樣本
5.可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數樣本可直接用蛋白酶K消化處理,無需機械破碎,減少了手動操作時間。為特殊樣本提供優化的純化方法,獲得高重復性、高純度的DNA,用于生物研究、基因型分析和獸醫病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自動核酸純化儀上自動化進行。
詳細信息:
性能
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動物血液和組織樣本中純化大量的總DNA。優化的實驗方案可確保非標準樣本的高產量,如動物毛發和培養細胞、固定的組織,或者革蘭氏陽性和陰性細菌。獨特的在線實驗方案參考文庫,可從酵母、昆蟲、毛發和其他類型樣本中純化DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kits從動物組織中純化的DNA產量
樣本來源 |
樣本量 |
DNA(μg) |
哺乳動物血液 |
100 μl |
3–6 |
鳥類血液 |
5 μl |
9–40 |
HeLa細胞 |
2 x 106 |
15–25 |
肝臟 |
25 mg |
10–30 |
腦 |
25 mg |
15–30 |
腎臟 |
25 mg |
15–30 |
脾臟 |
10 mg |
5–30 |
小鼠尾 |
1.2 cm(尾部) |
10–25 |
大鼠尾 |
0.6 cm(尾部) |
20–40 |
豬耳 |
25 mg |
10–30 |
馬毛 |
10 根毛發 |
2–4 |
魚鰭 |
20 mg |
10–20 |
魚卵(鯖魚) |
10 mg |
5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程,包括在生命科學、獸醫學和基因分型研究應用中常見的動物種類。純化得到的DNA不含PCR抑制劑,能在標準多重real-time PCR中進行靈敏的檢測。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實驗結果,從轉基因小鼠的實驗室分析到家畜的育種項目和種系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地擴大常規的檢測應用的規模。
原理
DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中,包括新鮮或冷凍的動物組織和細胞、血液或者細菌,快速純化總DNA(如,基因組、線粒體和病原體等)。
DNeasy膜整合了硅膠膜的結合特性,經簡單顯微離心技術或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設計的緩沖液條件,旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上,并且優化去除污染物和酶抑制劑。
純化過程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀,僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時處理多個樣本。對于高通量的應用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時處理96或192個樣本。
操作流程
可靠的硅膠膜技術,利用便捷的離心柱或96孔板形式,確保了快速可重復的DNA純化,不再需要有機抽提和乙醇沉淀(參見DNeasy Mini and 96 procedures)。樣本首先用蛋白酶K裂解。調整緩沖條件,以提供最佳的DNA結合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中,DNA選擇性地結合到DNeasy膜上,污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個高效的洗滌步驟中被去除。然后,用水或緩沖液將DNA洗脫,待用。
DNeasy Mini離心柱預裝在收集管中,并且單獨封存,確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動進行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式進行高通量處理。
應用
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質DNA,可直接用于多種下游分析,包括:
1.生命科學研究
2.家畜育種
3.種系基因分型研究
4.獸醫病理分析研究
5.常規的應用檢測
技術參數:
特點 |
參數 |
Applications |
PCR, real-time PCR, genotyping |
Elution volume |
100–200 μl |
Format |
96-well plate, spin column |
Main sample type |
Blood, tissue |
Processing |
Manual |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein |
DNA |
Sample amount |
100 μl/25 mg |
Technology |
Silica technology |
Time per run or per prep |
20 minutes – 1 hour |
Yield |
6 μg/30 μg |
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