質粒中提試劑盒QIAGEN Plasmid Midi Kit
純化至多100 μg轉染級質粒或柯斯質粒DNA
1.純化得到相當于2次CsCl梯度離心得到的DNA純度
2.高產量質粒DNA
3.經濟的制備方法
4.使用LyseBlue,獲得最佳的裂解效果和最大的DNA產量
QIAGEN Plasmid Kits通過重力流陰離子交換柱純化轉染級質粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多100 μg質粒DNA。離心獲得澄清的裂解產物和異丙醇沉淀。
詳細信息:
性能
QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100陰離子交換柱高效純化質粒DNA。只需25–100 ml培養基,即可純化獲得多達100 μg的高拷貝質粒DNA。(培養容量取決于質粒拷貝數、插入片段大小、宿主菌株和培養基。)QIAGEN Plasmid Kits純化的質粒DNA適合多種應用,如:轉染、克隆、測序和體外轉錄。
原理
QIAGEN-tips內獨特的陰離子交換樹脂專為純化核酸設計。它獨特的分離特性,使純化的DNA的純度相當于連續2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,縮短了純化質粒的手動操作時間。整套QIAGEN質粒純化體系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質,減小對使用者和環境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,細菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱,質粒DNA在適當的低鹽條件和pH條件下與樹脂進行選擇性結合。RNA、蛋白質、代謝產物和和其它低分子量雜質用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫純質粒DNA。純化得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,通過離心收集。
應用
QIAGEN Plasmid Kits純化得到的質粒DNA適合多種應用,如:
1.轉染
2.克隆
3.PCR
4.體外轉錄
技術參數:
特點 |
參數 |
Applications |
Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc. |
Culture volume/starting material |
25–100 ml culture volume |
Plasmid type |
High-copy, low-copy, cosmid DNA |
Processing |
Manual (centrifugation) |
Samples per run; throughput |
1 sample per run |
Technology |
Anion-exchange technology |
Time per run or prep per run |
150 min |
Yield |
<100 μg |
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